mpc-5细胞| mpc-5小鼠肾小球足细胞 处理方法
素冉生物依托同济大学,上海市东方医院,上海市第一妇婴保健院供应人脐带间充质干细胞,人脂肪干细胞,无血清细胞冻存液,ips功能性细胞,huvec细胞,各类细胞株细胞系,所有人源细胞均str鉴定后入库。并供应各类血清,培养基,胰酶,双抗,完全培养基等。
产品名称:mpc-5细胞
中文名称:mpc-5小鼠肾小球足细胞
规格:t25瓶
形态特征:上皮样细胞生长
生长状态:贴壁生长
是否str鉴定:
培养条件:dmem+10%fbs(推荐hakata优等胎牛血清 货号:hn-fbs-500)
传代方法:1:2传代
冻存条件:hakata ® 无血清细胞冻存液货号:h-w-100 规格:100ml
支原体检测:阴性
使用权限:a类
参考文献:
复苏周期:10个工作日左右
培养步骤:
1)复苏细胞:将含有1ml细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5ml培养基混合均匀。在1000rpm条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6ml完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的pbs润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%trypsin-0.53mm edta)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000rpm条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2ml培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
ps:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至t25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000rpm条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,进行离心收集,1000rpm条件下离心8-10分钟,去除上清,按冻存数量加入血清及dmso,冻存比例为90%fbs+10%dmso。
ps:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至t25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
处理方法:
1. 收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置若干小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100×,200×各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行售后的依据。
2. 收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费重发一次细胞。
3. 由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素的影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后是需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后与客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。
4. 如客户对细胞的种类、纯度、活性等特性有疑问,需提供相应的生物学实验检测结果作为依据。
备注:各位老师收到后用无菌离心管收集瓶中培养基,留作过渡培养
人t细胞白血病细胞;6t-cem 人t细胞白血病细胞;6t-cem t25
人急性淋巴细胞白血病细胞;cem/c1 人急性淋巴细胞白血病细胞;cem/c1 t25
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dt40 dt40(鸡淋巴瘤细胞) t25
dc2.4 dc2.4 t25
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hbmec人脑微血管内皮细胞 hbmec人脑微血管内皮细胞 t25
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id8 id8小鼠卵巢癌细胞 t25
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tu 686 人喉癌细胞 tu 686 t25
ketr-3 人肾癌细胞 t25
snu-216 snu-216;人胃癌细胞 t25
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u343 人脑胶质瘤细胞 t25
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ccc-esf-1 人胚皮肤成纤维细胞;ccc-esf-1 t25
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hcmec/d3 hcmec/d3(永生化人脑微血管内皮细胞) t25
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4t1/luc 小鼠乳腺癌细胞带荧光素酶 t25
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ct26.wt/luc 小鼠结肠癌细胞带荧光素酶 t25
143b/luc 人骨肉瘤细胞带荧光素酶 t25
smmc7721/gfp 人肝癌细胞带绿色荧光 t25
p815 小鼠肥大细胞瘤细胞;p815 t25
hkc 人肾小管上皮细胞;hkc t25
huvec 人脐静脉血管内皮细胞;huvec t25
aro 人甲状腺癌细胞aro t25
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mmq 大鼠垂体瘤细胞;mmq t25
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kns-89 kns-89人脑胶质细胞瘤细胞 t25
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