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96T人CXC趋化因子配体10ELISA 检测试剂盒的准备

2024/3/31 5:07:30发布5次查看
人cxc趋化因子配体10elisa 检测试剂盒
本试剂仅供研究使用 标本:血清或血浆
试验原理:
cxcl-10试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(elisa).已知cxcl-10浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将cxcl-10和*标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的hrp。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物a、b,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中cxcl-10的浓度呈比例关系。
人cxc趋化因子配体10elisa 检测试剂盒
操作注意事项
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物a、b液时,避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物a应挥发,避免长时间打开盖子。底物b对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取od值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----edta、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人cxc趋化因子配体10elisa 检测试剂盒
操作步骤
使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-hrp,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入底物a、b各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的od值。
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到的结果。
试剂盒性能
1. 灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数r值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
人cxc趋化因子配体10elisa 检测试剂盒
结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的od值
2、以吸光度od值为纵坐标(y),相应的cxcl-10标准品浓度为横坐标(x),做得相应的曲线,样品的cxcl-10含量可根据其od值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-800pg/ml
4、敏感度: 1.0 pg/ml
tau protein 微管相关蛋白抗体0.2ml
phospho-tau protein (pthr489) 磷酸化微管相关蛋白抗体0.1ml
phospho-tau protein (pthr489) 磷酸化微管相关蛋白抗体0.2ml
map-2(microtubule associated protein 2) 微管相关蛋白2抗体0.2ml
map1a/mtap1a(microtubule associated protein 1a) 微管相关蛋白1a抗体0.1ml
rabbit anti-human iga/hrp 辣根过氧化物酶标记兔抗人iga0.1ml
rabbit anti-monkey igg/hrp 辣根过氧化物酶标记兔抗猴igg0.1ml
rabbit anti-monkey igm/hrp 辣根过氧化物酶标记兔抗猴igm0.1ml
map1a/mtap1a(microtubule associated protein 1a) 微管相关蛋白1a抗体0.2ml
tbx2/t-box2(t-box protein 2) 新型抑癌基因抗体(一种新发现的抑癌基因)0.2ml
tcf7l2/tcf-4(t-cell-specific transcription factor 4) 转录因子7类似物2抗体0.2ml
tdp-43/tardbp (tar dna binding protein) tar dna 结合蛋白43抗体0.1ml
tdp-43/tardbp (tar dna binding protein) tar dna 结合蛋白43抗体0.2ml
phlda1/tdag51(pleckstrin homology-like domain family a member 1) t淋巴细胞凋亡相关蛋白tdag51抗体0.2ml
tem 1/cd248(tumor endothelial marker 1 precursor) 内涎蛋白/内皮唾液酸蛋白抗体0.2ml
rabbit anti-mouse igm/hrp 辣根过氧化物酶标记兔抗小鼠igm0.1ml
rabbit anti-mouse igm/hrp 辣根过氧化物酶标记兔抗小鼠igm1ml
rabbit anti-pig igg/hrp 辣根过氧化物酶标记兔抗猪igg0.1ml
rabbit anti-pig igg/hrp 辣根过氧化物酶标记兔抗猪igg1ml
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